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AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白

AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白

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　　AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白

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　　英文名称：Recombinant Anti-Mullerian Hormone (AMH)

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　　MIF; MIH; MIS; Müllerian Inhibiting Factor; Müllerian Inhibiting Hormone; Müllerian Inhibiting Substance

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　　宿主：E.coli

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　　规格：10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

　　内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)具体详见说明书

　　片段与标签：Thr409~Arg644 with N-teral His Tag

　　物种来源（人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猕猴、山羊、绵羊、马、牛、猪、鸡、狗等其他物种多物种）相同的名称，不同的物种。

　　AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白性状：冻干粉

　　表达系统： 大肠杆菌

　　产品纯度：>95%-98%（SDS-PAGE & RP-HPLC）

　　保存条件：如果样品在2-4周内使用，可以在4°C低温储存。

　　长期储存，建议添加载体蛋白（0.1％HSA或BSA），并储存在-20~ -80°C。避免多次冻融。

　　AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白

　　蛋白重组表达策略组合

　　重组蛋白的表达往往不像理论那样一帆风顺，在实际的表达过程中有可能产生各种各样的问题。在选择一个的蛋白表达策略非常困难的情况下，那么采用看似笨拙的方法，有可能会成为一种意想不到的“成功捷径”，比如项目要求构建表达两种重组蛋白时，构建6种不同的表达质粒，意味着有36种不同的表达条件组合，疯狂造娃网，通过高通量微量蛋白表达实验一次性就可获得蛋白表达条件组合，后续中式飞行试验和成本控制会变得相对容易。

　　蛋白原核重组表达服务具体流程

　　AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白融合标签选择：

　　亲和标签：蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用：一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易；另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类：一类是短肽类标签；一类是长肽以融合蛋白（fused partner）形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。

　　不同的系统步骤稍微有些不同的，大致步骤如下：

　　真核表达系统的重组蛋白表达步骤：

　　a. 选择表达载体和宿主细胞（常用的CHO和HEK293）

　　b. 表达载体的构建

　　c. 无内毒素的质粒抽提

　　d. 细胞瞬时转染

　　e. 表达小试，条件优化

　　f. 表达分析和鉴定（SDS-PGAE和WB）

　　g. 大量表达

　　h. 亲和纯化

　　i. 检测和鉴定

　　原核表达系统的重组蛋白表达步骤：

　　a. 选择表达载体

　　b. 密码子优化

　　c. 基因合成/亚克隆

　　d. 转化表达菌株

　　e. 蛋白表达小试分析

　　f. 如果蛋白可溶，蛋白亲和纯化

　　g. 如果蛋白不可溶，则需要变复性来制备可溶蛋白。

　　h. 鉴定，包括SDS-PAGE和WB鉴定

　　AMH蛋白；抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白表达蛋白的分析、纯化、检测

　　诱导表达成功后，表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当，按一般的实验步骤做没太大的问题。

　　虽然，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少高级修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象等缺点，但原核表达具有的操作简单、快捷，需时较短，表达产量高，适合工业化等优点，仍是我们合成外源蛋白的选择。原核表达的全过程有许多不确定因素，所以每完成一步都得检验结果是否正确，当实验遇到困难时如何进行分析，找到问题的症结是我们实验的关键。

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